PART 01

免疫治療已在多種腫瘤的治療中顯示出有效性和安全性，并被廣泛應(yīng)用，已成為惡性腫瘤治療新的里程碑。然而，并不是所有患者都能從免疫治療中獲益，因此需要借助特定的生物標(biāo)志物來篩選適宜人群和預(yù)測(cè)免疫治療的療效。PD-L1、微衛(wèi)星不穩(wěn)定、腫瘤突變負(fù)荷、腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞等生物標(biāo)志物被證實(shí)具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，其中PD-L1表達(dá)是目前應(yīng)用最廣的免疫治療生物標(biāo)志物。

隨著臨床實(shí)踐數(shù)據(jù)的積累，PD-1/PD-L1抑制劑在多種腫瘤中均被證實(shí)有效，現(xiàn)已用于包括肺癌、食管癌、胃癌、尿路上皮癌、肝癌、結(jié)直腸癌、乳腺癌、經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤及惡性黑色素細(xì)胞瘤等腫瘤的治療之中。一系列臨床研究結(jié)果證實(shí)腫瘤細(xì)胞或腫瘤相關(guān)免疫細(xì)胞的PD-L1表達(dá)水平與免疫治療療效及患者預(yù)后密切相關(guān)。PD-L1作為預(yù)測(cè)免疫治療藥物療效的標(biāo)志物，對(duì)于免疫治療藥物的應(yīng)用具有伴隨診斷（companion diagnostics）和補(bǔ)充診斷（complementary diagnostics）的價(jià)值。

PART 02

免疫組織化學(xué)檢測(cè)PD-L1表達(dá)作為抗PD-1/PD-L1治療的預(yù)測(cè)性生物標(biāo)志物，需遵循藥物-疾病-診斷分析（drug-disease-diagnosis，3D）原則，臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)是針對(duì)特定的疾病類型、選用了特定的免疫治療藥物以及特定的PD-L1免疫組織化學(xué)檢測(cè)方法，根據(jù)分層分析結(jié)果篩選出了獲益人群，同時(shí)PD-L1免疫組織化學(xué)判讀閾值是經(jīng)過臨床實(shí)踐驗(yàn)證的。所以，不同類型免疫治療藥物對(duì)應(yīng)的PD-L1檢測(cè)試劑盒不盡相同，與療效相關(guān)的PD-L1陽性判讀閾值亦不盡相同。

PD?L1免疫組織化學(xué)抗體需與配套的檢測(cè)系統(tǒng)在對(duì)應(yīng)的檢測(cè)平臺(tái)中進(jìn)行：目前有多個(gè)PD-L1 免疫組織化學(xué)檢測(cè)抗體試劑盒，如22C3 pharmDx（Dako）、28-8 pharmDx （Dako）、SP142（Ventana）、SP263（Ventana）、73-10（Dako）及E1L3N（CST），在3個(gè)免疫組織化學(xué)平臺(tái)（Dako Autostainer Link 48、Ventana BenchMark、Leica Bond 免疫組織化學(xué)全自動(dòng)染色系統(tǒng)）進(jìn)行檢測(cè)。除了73-10外，其他5種抗體都已經(jīng)在國內(nèi)獲批。

表1 PD-L1免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒及配套的檢測(cè)系統(tǒng)、檢測(cè)平臺(tái)^[1]

PART 03

帕博利珠單抗商品名為 Keytruda（可瑞達(dá)），由于通用名過于拗口，中文腫瘤界經(jīng)常稱為K藥，即使在國內(nèi)很多大型正式腫瘤會(huì)議，很多與會(huì)專家也將其稱為K藥，可見國內(nèi)整個(gè)腫瘤學(xué)界對(duì)K藥的一致認(rèn)可。

22C3在臨床開展最早的KEYNOTE-001研究是一項(xiàng)針對(duì)接受帕博利珠單抗治療的晚期NSCLC患者的I期臨床試驗(yàn)， NSCLC擴(kuò)展隊(duì)列研究總共入組495例患者，包括182例訓(xùn)練集和313例驗(yàn)證集人群。該研究采用22C3抗體檢測(cè)患者PD-L1的表達(dá)，在訓(xùn)練集人群選擇不同的PD-L1 cut-off值及多種評(píng)分系統(tǒng)評(píng)估生物標(biāo)志物，通過ROC曲線轉(zhuǎn)折點(diǎn)確定PD-L1 cut-off值為 TPS≥50%，之后在驗(yàn)證集人群確認(rèn)PD-L1 TPS≥50%人群療效更好且總生存期延長。隨后的KEYNOTE-010研究也采用PD-L1表達(dá)分層，研究顯示在伴有PD-L1陽性（TPS≥1%）的轉(zhuǎn)移性NSCLC中，帕博利珠單抗可以作為二線治療，OS有顯著改善。而KEYNOTE-042研究進(jìn)一步將人群標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)大至 PD-L1 TPS≥1%，結(jié)果提示與化療相比，帕博利珠單抗顯著降低死亡風(fēng)險(xiǎn)， NMPA于2019年批準(zhǔn)其一線適應(yīng)證，適用于PD-L1 TPS≥1%的EGFR及ALK陰性NSCLC患者。

后續(xù)多個(gè)臨床試驗(yàn)中PD-L1表達(dá)檢測(cè)都使用了22C3抗體，并基于PD-L1表達(dá)分層分析的療效數(shù)據(jù)在不同適應(yīng)癥中形成了臨床cut-off值（表2）。

PART 04

納武利尤單抗商品名為歐狄沃，由于納武利尤單抗這個(gè)通用名過于拗口，大家經(jīng)?？谡Z化的以“歐狄沃”或“O藥”稱呼，與“K 藥”并稱為“OK雙雄”。

基于CheckMate -227的臨床試驗(yàn)結(jié)果，2020年5月，美國FDA批準(zhǔn)了PD-1抑制劑納武利尤單抗+ CTLA-4抑制劑伊匹木單抗(“O藥+Y藥”)聯(lián)合療法用于一線治療EGFR或ALK陰性且腫瘤表達(dá)PD-L1(≥1%)的轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌成人患者。

CheckMate-274研究顯示，在PD-L1表達(dá)腫瘤細(xì)胞≥1%的患者中，納武利尤單抗將疾病復(fù)發(fā)或死亡風(fēng)險(xiǎn)降低54%，基于此研究結(jié)果，2023年1月，納武利尤單抗獲批用于接受根治性切除術(shù)后伴有高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)尿路上皮癌（UC）患者的輔助治療，成為我國首個(gè)且唯一獲批用于UC輔助治療的 PD-1 抑制劑。

后續(xù)針對(duì)多個(gè)適應(yīng)癥的臨床試驗(yàn)中PD-L1表達(dá)檢測(cè)都使用了28-8抗體，并基于療效數(shù)據(jù)在不同適應(yīng)癥中形成了臨床cut-off值（表3）。

PART 05

基于BGB-A317-204的II期研究，2020年4月10日，PD-1抑制劑替雷利珠單抗新適應(yīng)癥獲NMPA批準(zhǔn)，用于治療接受含鉑化療失敗包括新輔助或輔助化療12個(gè)月內(nèi)進(jìn)展的局部晚期或轉(zhuǎn)移性PD-L1高表達(dá)的尿路上皮癌（UC）患者，SP263為替雷利珠單抗的伴隨診斷檢測(cè)試劑。

根據(jù)PACIFIC的研究結(jié)果，在總生存期的亞組分析中，除了PD-L1表達(dá)陰性（TC＜1%）的患者，其他亞組都更傾向于使用度伐利尤單抗進(jìn)行治療。

下表中列出了部分PD-L1表達(dá)檢測(cè)使用SP263抗體的臨床試驗(yàn)，及基于PD-L1表達(dá)分層分析的療效數(shù)據(jù)形成的臨床cut-off值（表4）。

PART 06

阿替利珠單抗（泰圣奇）在臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)，為了使獲益人群更廣，療效不受檢測(cè)抗體的限制，分別使用了SP142、22C3及SP263抗體進(jìn)行IHC檢測(cè)，檢測(cè)的患者分別有554例、534例及546例，結(jié)果提示不論是SP142、22C3或SP263抗體檢測(cè)，都能觀察到PD-L1高表達(dá)患者從阿替利珠單抗治療中實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的OS獲益。2021年4月29日，PD-L1抑制劑阿替利珠單抗（泰圣奇）獲得NMPA批準(zhǔn)用于PD-L1高表達(dá)（TC≥50％或IC≥10％）晚期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的一線治療。

基于IMpower132的研究結(jié)果，2021年6月22日， NMPA批準(zhǔn)免疫藥物PD-L1抗體阿替利珠單抗新適應(yīng)癥，此次獲批的適應(yīng)癥為：聯(lián)合培美曲塞和鉑類化療用于無 EGFR 突變和無ALK突變的轉(zhuǎn)移性非鱗非小細(xì)胞肺癌患者的一線治療。

下表中列出了部分PD-L1表達(dá)檢測(cè)使用SP142抗體的臨床試驗(yàn)，及基于PD-L1表達(dá)分層分析的療效數(shù)據(jù)形成的臨床cut-off值（表5）。

PART 07

E1L3N抗體為最新獲NMPA批準(zhǔn)的國產(chǎn)PD-L1表達(dá)檢測(cè)試劑，用于非小細(xì)胞肺癌患者組織切片中PD-L1蛋白的表達(dá)檢測(cè)，伴隨的藥物為帕博利珠單抗。

總結(jié)

此篇內(nèi)容主要介紹了PD-L1免疫組化檢測(cè)5種常見抗體的應(yīng)用，可以看出同一適應(yīng)癥不同藥物對(duì)應(yīng)的PD-L1檢測(cè)試劑盒不同，與療效相關(guān)的PD-L1陽性判讀閾值亦不相同，那么不同抗體間檢測(cè)的結(jié)果是否可以互用，陽性判讀閾值是否可以互用？下篇將針對(duì)這些問題，詳細(xì)介紹不同抗體互用性比較結(jié)果及熙寧生物|精翰生物PD-L1檢測(cè)服務(wù)，敬請(qǐng)期待。

[1] 實(shí)體腫瘤PD-L1免疫組織化學(xué)檢測(cè)專家共識(shí)（2021版）

[2] Kang SP, Gergich K, Lubiniecki GM, et al. Pembrolizumab KEYNOTE-001: an adaptive study leading to accelerated approval for two indications and a companion diagnostic. Ann Oncol. 2017;28(6):1388-1398. doi:10.1093/annonc/mdx076

[3] Downs-Canner S, Mittendorf EA. Preoperative Immunotherapy Combined with Chemotherapy for Triple-Negative Breast Cancer: Perspective on the KEYNOTE-522 Study [published correction appears in Ann Surg Oncol. 2023 Apr 4;:]. Ann Surg Oncol. 2023;30(6):3166-3169. doi:10.1245/s10434-023-13267-z

[4] Lu S, Fang J, Wang Z, et al. Primary results from the China Cohort of IMpower132: atezolizumab (atezo) + carboplatin (carbo) or cisplatin (cis) + pemetrexed (pem) as first-line therapy in advanced NSCLC[EB/OL]. ELCC 2021, abstract 102P.

[5] 102P - Primary results from the China Cohort of IMpower132: atezolizumab (atezo) + carboplatin (carbo) or cisplatin (cis) + pemetrexed (pem) as first-line therapy in advanced NSCLC

[6] Hirsch FR, McElhinny A, Stanforth D, et al. PD-L1 Immunohistochemistry Assays for Lung Cancer: Results from Phase 1 of the Blueprint PD-L1 IHC Assay Comparison Project. J Thorac Oncol. 2017;12(2):208-222. doi:10.1016/j.jtho.2016.11.2228

[7] Tsao MS, Kerr KM, Kockx M, et al. PD-L1 Immunohistochemistry Comparability Study in Real-Life Clinical Samples: Results of Blueprint Phase 2 Project. J Thorac Oncol. 2018;13(9):1302-1311. doi:10.1016/j.jtho.2018.05.013

[8] Ahn S, Lee Y, Kim JW, et al. Programmed cell death ligand-1 (PD-L1) expression in extrahepatic biliary tract cancers: a comparative study using 22C3, SP263 and E1L3N anti-PD-L1 antibodies. Histopathology. 2019;75(4):526-536. doi:10.1111/his.13901

[9] Munari E, Zamboni G, Lunardi G, et al. PD-L1 expression in non-small cell lung cancer: evaluation of the diagnostic accuracy of a laboratory-developed test using clone E1L3N in comparison with 22C3 and SP263 assays. Hum Pathol. 2019;90:54-59. doi:10.1016/j.humpath.2019.05.003

[10] Zhang W, Cao Z, Gao C, et al. High concordance of programmed death-ligand 1 expression with immunohistochemistry detection between antibody clones 22C3 and E1L3N in non-small cell lung cancer biopsy samples. Transl Cancer Res. 2020;9(10):5819-5828. doi:10.21037/tcr-20-101

[11] Song L, Zeng L, Yan H, et al. Validation of E1L3N antibody for PD-L1 detection and prediction of pembrolizumab response in non-small-cell lung cancer. Commun Med (Lond). 2022;2(1):137. Published 2022 Nov 1. doi:10.1038/s43856-022-00206-4

[12] Smith J, Robida MD, Acosta K, et al. Quantitative and qualitative characterization of Two PD-L1 clones: SP263 and E1L3N. Diagn Pathol. 2016;11(1):44. Published 2016 May 18. doi:10.1186/s13000-016-0494-2

[13] Smith J, Robida MD, Acosta K, et al. Quantitative and qualitative characterization of Two PD-L1 clones: SP263 and E1L3N. Diagn Pathol. 2016;11(1):44. Published 2016 May 18. doi:10.1186/s13000-016-0494-2

[14] 中國非小細(xì)胞肺癌PD－L1表達(dá)檢測(cè)臨床病理專家共識(shí)[J]. 中華腫瘤雜志,2020,42(7):513-521.

[15] Zhou YJ, Li G, Wang J, et al. PD-L1: expression regulation. Blood Sci. 2023;5(2):77-91. Published 2023 Jan 13. doi:10.1097/BS9.0000000000000149

[16] Patel SP, Kurzrock R. PD-L1 Expression as a Predictive Biomarker in Cancer Immunotherapy. Mol Cancer Ther. 2015;14(4):847-856. doi:10.1158/1535-7163.MCT-14-0983

[17] Tsao MS, Kerr KM, Kockx M, et al. PD-L1 Immunohistochemistry Comparability Study in Real-Life Clinical Samples: Results of Blueprint Phase 2 Project. J Thorac Oncol. 2018;13(9):1302-1311. doi:10.1016/j.jtho.2018.05.013